科研焦点｜喜舒复®骨肽特膳饮品基于骨胶原蛋白肽靶向筛选，高活性与高纯度骨肽足量添加！中国农业科学院农产品加工研究所，农业农村部农产品加工综合性重点实验室发表的论文《促成骨细胞增殖活性骨胶原蛋白肽的靶向筛选及活性分析》中，已证实牦牛骨胶原蛋白肽具有良好的成骨活性，能显著改善去卵巢骨质疏松大鼠模型症状[1]，本研究成功地从牦牛骨胶原蛋白肽中筛选出具有潜在促成骨细胞增殖活性的肽段GK-22，并通过体外细胞试验验证了其生物活性。
喜舒复®骨肽特膳饮品是基于循证医学，以酶解牛骨胶原蛋白小分子活性短肽、软骨提取物为核心成分，科学配伍壳寡糖、姜黄、双钙源及三种维生素经现代生物工程技术制备而成的骨营养要素型强化口服营养补充剂ONS，科学组方配伍，众多指南共识，喜舒复®骨肽特膳饮品是针对性满足骨骼机体组织生长和修复需求的临床营养整体解决方案！
随着现代生物技术的不断发展，肽类生物活性物质在医药、食品等领域应用广泛。其中，骨胶原蛋白肽因其独特的生物活性（如增强骨组织的再生能力，加速骨愈合过程，促进骨密度增加等），受到研究者的广泛关注。然而传统的骨胶原蛋白肽制备方法往往得到的是混合肽，其生物活性多样且难以精准控制。因此，如何从混合肽中筛选出具有特定生物活性的肽段，成为当前研究的热点。 本研究旨在通过高效液相色谱法（HPLC）与液相色谱-串联质谱法（nano LC-MS/MS）对酶法制备的牦牛骨胶原蛋白肽进行分子量与序列构成的测定，并基于与表皮生长因子受体（EGFR）的对接，靶向筛选具有潜在促成骨细胞增殖活性的肽段。通过体外细胞增殖培养验证，靶向筛选促成骨细胞增殖活性肽。
研究发现，低分子质量的牛骨胶原蛋白肽（＜3 000 Da）、牦牛骨胶原蛋白肽（＜3 000 Da）以及猪骨胶原蛋白肽（＜1 000 Da）均能显著促进MC3T3-E1细胞增殖，发挥成骨活性。因此，本实验制备的牦牛骨胶原蛋白肽可能具有开发成为抗骨质疏松功能食品的潜在价值，故进行后续实验。
喜舒复®骨肽特膳饮品的生产技术“一种基于超滤技术的高纯度骨肽及其酶解制备系统”实现了对骨肽的高纯度提取和酶解制备，解决本领域普遍存在制作骨肽过程中的过滤效率过低而影响骨肽产品的生产质量和效率、生产过程中的纯化处理效率低而造成所生产的骨肽纯度不合格等问题，充分保障了喜舒复®骨肽特膳饮品的高纯度与高活性，具备行业技术新颖性和先进性，荣获国家发明专利！ 根据里宾斯基五规则，相对分子量<500 Da的化合物往往具有较高的生物利用度和较好的药物代谢动力学性质，更易开发成为口服药物[2, 3]。SGS国际第三方检测机构评定，分子量分布测定结果表明喜舒复®骨肽特膳饮品牛骨胶原蛋白肽原料混合肽中相对分子量<500 Da的比例高达 33%。
将细胞在多肽浓度分别为0.1mg/mL，0.5mg/mL，1.0mg/L 和 3.0 mg/mL 条件下分别培养48h，发现当浓度≤1.0 mg/mL 时，所有多肽均无显著促MC3T3-E1细胞增殖活性，GP-17、GP-18和TP-14甚至能抑制细胞增殖；在浓度为 3.0 mg/mL 时，GK-22能显著促进MC3T3-E1细胞的增殖，并且表现出剂量—效应关系，说明GK-22可能是促进MC3T3-E1细胞增殖的特征性序列，具有潜在的研究价值。  骨胶原蛋白经复合酶酶解可获得低分子量（<3000 Da）的混合肽，但发挥促成骨细胞增殖活性的肽序列尚不明确。本研究采用 nano LC-MS/MS技术测定混合肽序列，以牦牛骨胶原蛋白肽GD-18和GP-16为阳性对照，通过 CDOCKER半柔性对接技术筛选获得具有潜在促成骨细胞增殖活性的牦牛骨胶原蛋白肽GP-18、TP-14、GP-17、GK-21和GK-22，体外细胞增殖培养试验进一步表明，GK-22可通过与EGFR 结合，发挥促成骨细胞增殖活性。
喜舒复®骨肽特膳饮品是通过一种基于超滤技术的高纯度骨肽及其酶解制备系统（已申获国家发明专专利）生产而成的，高活性与高纯度骨肽足量添加使其临床营养价值高，赢得了消费者的广泛认可！特别适宜创伤外科、关节外科、脊柱外科围手术期与术后康复期、骨关节炎与骨质疏松症的保守治疗期、运动损伤康复期的患者高效强化骨营养、充分促进骨骼及组织生长与修复、缓解骨创伤与关节疼痛、缩短患者骨骼修复周期！ 喜舒复®骨肽特膳饮品是国家发明专利产品、广东省名优高新技术产品，研发企业意润健康制定并实施的《喜舒复®骨肽特殊膳食运动营养食品（补充蛋白质类）》企业标准进行先进性评审，广东省标准化协会组织专家组确认该标准的“产品主要技术指标填补国家标准、行业标准空白”，被评价为广东省先进标准！ [1] YE M L, ZHANG C H, JIA W, et al. Metabolomics strategy reveals the osteogenic mechanism of yak (Bos grunniens) bone collagen peptides on ovariectomy-induced osteoporosis in rats[J]. Food & Function, 2020, 11(2): 1498-1512. DOI:10.1039/c9fo 01944h. [2] ODI R, BIBI D, WAGER T, ET AL. A perspective on the physicochemical and biopharmaceutic properties of marketed antiseizure drugs—From phenobarbital to cenobamate and beyond[J]. Epilepsia, 2020, 61(8): 1543-1552.DOI:10.1111/epi.16597 [3] xxTEMEL H E, ALTINTOP M D, ÖZDEMIR A. Synthesis and Evaluation of a New Series of Thiazolyl-pyrazoline Derivatives as Cholinesterase Inhibitors.[J]. Turkish journal of pharmaceutical sciences, 2018, 15(3): 333-338.DOI:10.4274/tjps.20982
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